jueves, 1 de febrero de 2018

(2/6) Prehibridación

Procedemos a incubar la membrana con la muestra en una solución de prehibridación. Esto impide las uniones inespecíficas de la sonda a la membrana. De esta forma nos aseguramos que tan solo la secuencia diana se pueda unir a la diana.

La solución de prehibridación posee una composición similar a las soluciones de hibridación, pero carece de sonda. Es la siguiente:
-SSC.
-SDS.
-Solución denhardt.
-EDTA.
-ADN de esperma de salmón desnaturalizado 100 microgramo/ml (evita las uniones inespecíficas a la membrana).

Con esta misma solución incubamos la membrana que utilizaremos para la hibridación (la duración varia de unos minutos a unas horas).

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